知道新细胞正在获得营养是很重要的,莱斯大学科学家正在研究一种确定的方法。生物工程师简•格兰德-艾伦的莱斯实验室(Rice lab)发明了一种软微粒子传感器,用于监测作为生长组织支架水凝胶中的氧含量。莱斯布朗工程学院和其他地方正在开发的水凝胶可以放置在受伤处,植入活细胞后,水凝胶会促进新肌肉、软骨的生长,或许有一天,还会促进整个器官的生长,理想情况下,水凝胶会吸引血管注入这种物质,为细胞提供营养。
格兰德-艾伦和团队设计了荧光粒子来报告凝胶内的氧气含量,研究发表在《ACS生物材料科学与工程》上。Grande-Allen说:我们一直在与肠道机械生物学的科学家合作,希望用一种直接的方法告诉我们在三维组织培养中有多少氧,当想要获得特定水平的氧气时,要确定这就是细胞所获得的。有多种方法可以做到这一点,可以建立计算模型,但必须对氧气渗透培养基和三维支架材料的方式做出几个假设,更好的方法是直接测量。
主要作者里德威尔逊,医学博士/博士,莱斯大学和贝勒医学院的学生,在莱斯大学校友马修·赛普和莱斯大学研究生塞尔吉奥·巴里奥斯的基础上,开发了一种软微粒,这种微粒含有一种基于钯和参考荧光团的氧触发荧光分子。
威尔逊经历了几次染料组合和浓度的反复试验,以开发出这些微粒。在三维培养中使用对氧敏感的荧光团问题是,它们的信号不够亮,无法可靠地测量。所以在微粒中加入高浓度的染料,这样就可以对氧浓度进行更可靠的测量。
这些颗粒可以和活细胞一起悬浮在水凝胶中,实验表明对这些细胞没有毒性。荧光元件发出的信号可以在各自波长上读取,但能力在于将两者的反应结合起来,这使临床医生能够测量组织中2毫米远的氧气含量。这很小,但氧气扩散的极限通常很小,有些细胞非常接近血液供应,血红蛋白血细胞带来高氧水平。但微生物群中的一些细菌通常厌氧,在没有氧气的情况下生存得更好。
当以合适的波长照射这些粒子时,它们不会受到光漂白(褪色)的影响,也不会像较大的荧光粒子那样从水凝胶中下沉,即使是在储存一年之后。软骨和某些类型的病变心脏瓣膜等组织没有血管网络,但细胞生长旺盛。研究人员一直想知道这些细胞是如何获得营养的,以及它们需要什么才能存活,在实验室里,利用氧传感微粒和其他技术来拉伸活的和工程材料,可以开始着手回答这些问题。